Meaisín eastósctha agus braite aigéid núicléigh go hiomlán uathoibríoch New Tech

Cúig neart :
● Ionstraim cumraithe leis an eastóscadh aigéid núicléacha agus céim íonaithe
● Ionstraim cumraithe le modúl eastóscadh ultrasonaic
● Ionstraim cumraithe le go hiomlán uathoibríoch
● Ionstraim cumraithe le aimpliú teochta athraitheach
● Uirlis cumraithe le trealamh imoibrí lániata

1.An gá imoibrithe braite aigéid núicléigh a eastóscadh agus a íonú?
Is é seo a leanas prionsabal an bhrath aigéid núicléigh: faoi ghníomh an primer, úsáidtear DNA polymerase chun aimpliú imoibriú slabhrúil a dhéanamh ar an teimpléad DNA/RNA (a éilíonn trascríobh droim ar ais NA), agus ansin aimsítear méid an chomhartha fluaraiseachta a scaoiltear chun a chinneadh. cibé an bhfuil aigéad núicléasach (DNA/RNA) na pataigin atá le brath sa sampla.

1) D'fhéadfadh go leor comhpháirteanna a dhéanann difear don toradh deiridh a bheith i samplaí nach bhfuil eastósctha nó íonaithe: núicléas (is féidir leis an sprioc-aigéad núicléach a thuaslagadh agus diúltach bréagach a chur faoi deara), protease (is féidir DNA polymerase a laghdú agus diúltach bréagach a chur faoi deara), miotal trom salann (as a dtagann díghníomhú synthase agus is cúis le dearfach bréagach ), PH ró-aigéadach nó ró-alcaileach (a d’fhéadfadh go dteipeann ar an imoibriú), RNA neamhiomlán (as a leanann teip tras-scríobh diúltach bréagach).

2) Tá sé deacair roinnt samplaí a aimpliú go díreach: Gram-dearfach agus roinnt paraisítí, mar gheall ar a mballaí cille tiubh agus struchtúir eile, mura dtéann siad tríd an bpróiseas eastósctha agus íonúcháin aigéid núicléacha, d'fhéadfadh go dteipfidh ar an trealamh saor ó eastóscadh dá leithéid. samplaí.

Dá bhrí sin, moltar an trealamh tástála nó an ionstraim atá cumraithe leis an gcéim eastósctha aigéid núicléigh a roghnú.

2. Eastóscadh ceimiceach nó eastóscadh ilroinnt ultrasonaic fisiciúil?
Go ginearálta, is féidir eastóscadh ceimiceach a chur i bhfeidhm ar an gcuid is mó den réamhchóireáil agus den Íonú.Mar sin féin, i mbaictéir Gram-dearfach le ballaí tiubh agus roinnt paraisítí, tá sé an cás freisin nach féidir le heastóscadh ceimiceach teimpléid éifeachtúla aigéid núicléacha a fháil, rud a fhágann braite diúltach bréagach.Ina theannta sin, is minic a úsáideann eastóscadh ceimiceach gníomhairí láidir, mura bhfuil an elution críochnúil, tá sé éasca alcaile láidir a thabhairt isteach sa chóras imoibrithe, rud a fhágann torthaí míchruinn.

Úsáideann ilroinnt ultrasonaic brú fisiceach, a d'úsáid GeneXpert, príomhfhiontar i réimse POCT lena n-úsáid ag an duine, agus tá buntáiste iomlán aige in eastóscadh aigéad núicléach ar roinnt samplaí casta (cosúil le Mycobacterium tuberculosis).

Dá bhrí sin, moltar trealamh tástála nó uirlis a roghnú atá cumraithe le céim eastósctha aigéid núicléigh.agus tá sé is fearr má tá modúl eastóscadh ultrasonaic ann.

3. Lámhleabhar, Semi-uathoibríoch agus go hiomlán uathoibríoch?
Fadhb í seo a bhaineann le costas saothair agus le héifeachtúlacht oibre.Faoi láthair, tá ospidéil pheataí gan a ndóthain foirne, agus eastóscadh agus braite aigéid núicléacha ina saothar a éilíonn scileanna agus taithí áirithe.Níl aon amhras ann gurb é an meaisín eastósctha agus braite aigéid núicléacha go hiomlán uathoibríoch an rogha iontach.

4. Aimpliú teochta seasmhach nó aimpliú teochta inathraithe?
Is nasc braite aigéid núicléigh é an t-imoibriú aimpliúcháin, agus tá an teicneolaíocht ghairmiúil a bhaineann leis an nasc seo casta.Go garbh, úsáidtear einsímí chun an t-aigéad núicléach a aimpliú.Sa phróiseas aimpliúcháin, aimsítear an comhartha fluaraiseachta aimplithe nó an comhartha fluaraiseachta leabaithe.Go ginearálta, dá luaithe a fheictear an comhartha fluaraiseachta, is mó an t-ábhar géine sprice sa sampla.

Is aimpliú teochta tairiseach é aimpliú aigéid núicléigh ag teocht sheasta, agus is aimpliú teochta athraitheach é aimpliú timthriallach go docht de réir dínádúraithe-annealing-síneadh.Tá an t-am aimplithe teochta tairiseach déanta, agus cuireann ráta ardú teochta agus titim na hionstraime isteach go mór ar an am aimplithe teochta athraitheach (faoi láthair, tá go leor déantúsóirí in ann 40 timthriall aimpliúcháin a dhéanamh i thart ar 30 nóiméad).

Má tá na coinníollacha saotharlainne go maith agus go bhfuil an criosú dian, tá sé réasúnta a rá nach mbeidh an difríocht chruinneas idir an dá cheann mór.Mar sin féin, déanfaidh aimpliú teochta athraitheach níos mó táirgí aigéid núicléacha a shintéisiú in achar ama réasúnta níos giorra.Maidir le saotharlanna gan criosú dian agus pearsanra oiliúna gairmiúla, beidh an baol ann go mbeidh sceitheadh ​​aerasóil aigéid núicléiche níos mó, tarlaíonn an dearfach bréagach a luaithe a tharlaíonn sceitheadh, agus atá thar a bheith deacair é a dhíchur.

Ina theannta sin, tá aimpliú teocht tairiseach níos mó seans maith ar aimpliú neamhshonrach nuair a bhíonn an sampla casta (is ísle an teocht imoibrithe choibhneasta, agus dá airde an teocht síneadh, is amhlaidh is fearr an tsainiúlacht cheangailteach primer).

Chomh fada agus a bhaineann leis an teicneolaíocht reatha, tá aimpliú teochta athraitheach níos iontaofa.

5. Conas an baol a bhaineann le sceitheadh ​​táirgí aimpliúcháin aigéid núicléigh a sheachaint?
Faoi láthair, roghnaíonn go leor déantúsóirí an feadán PCR cineál gland mar fheadán imoibriúcháin aigéid núicléasaigh, atá séalaithe ag cuimilte, agus sroicheann an dínádúrú teochta sa dínádúrú teochta athraitheach san aimpliú PCR teocht athraitheach 90 céim.
céadghrád .Is dúshlán mór é an próiseas leathnaithe arís agus arís eile le teas agus crapadh le fuar do shéalú an fheadáin PCR, agus tá an feadán PCR cineál gland sách éasca a bheith ina chúis le sceitheadh.

Is fearr an t-imoibriú a ghlacadh le feiste/feadán atá séalaithe go hiomlán chun sceitheadh ​​an táirge imoibrithe a sheachaint.Bheadh ​​sé foirfe dá bhféadfaí trealamh iomlán séalaithe a oibriú amach le haghaidh eastóscadh agus braite aigéid núicléacha.

Mar sin tá na cúig rogha is fearr thuas ag meaisín nua eastósctha agus braite aigéid núicléigh go hiomlán uathoibríoch New Tech.